饲养尾水循环渠中底泥微囊藻毒素含量与水化目标的相关联络剖析
近年來，跟着饲养水平的不断提高，我国池塘饲养方式不再是单一的“进水渠-饲养池溏-排水渠”的办法，而是逐步向更高效更多元化的饲养方式展开，其间循环水饲养方式便是一种代表。循环水饲养体系是经过一系列水处理单元将饲养池中发生的废水处理后再次循环回用的方式。已有研讨报导[1-3]，循环水饲养方式有增产、下降氮磷等营养盐含量、下降浮游动植物的生物量等多重长处。当由饲养水体富营养化引起的蓝藻水华[4-5]迸发时，蓝藻门的某些藻类尤其是微囊藻（Microcystis）会向水体中开释很多的微囊藻毒素（microcystins，简称MCs）是蓝藻水华形成的首要损害之一[6]。MCs对水生动物有激烈的毒害效果，能够明显按捺其胚胎发育、成长及繁衍，严峻时乃至导致其大规模逝世[7-8]。但现在对MCs含量散布状况首要会集在天然湖泊、河流和池塘饲养中[9-11]，对新式的循环水饲养体系中MCs含量改变状况研讨甚少。 在循环水饲养体系中，饲养尾水循环渠首要是饲养废水的排放和开始净化部分。本研讨经过在蓝藻迸发时，检测室外饲养尾水循环渠的底泥中MCs含量（微囊藻毒素-RR，简称MC-RR;微囊藻毒素-LR，简称MC-LR）的改变，并剖析其与要害水化目标间相关联络，为今后采纳有用的防控与管理办法供给理论基础。
1 资料和办法
1.1 试验规划
试验于天津市水产研讨所淡水试验站展开，挑选终年迸发蓝藻的淡水鱼类饲养尾水循环渠，在循环渠中等距离设置3个采样点，每2个采样点之间距离4 m。检测目标有总氮（TN）、总磷（TP）、有机耗氧量（COD） 3个水化目标，以及底泥中的MC-RR和MC-LR含量，二者之和即为MCs含量。
试验于2018年8月12—22日蓝藻迸发盛期进行，每2 d进行1次采样，每次采样水体和底泥各设3个重复。
1.2 水化目标的测定
水化目标TN选用碱性过硫酸钾消解紫外分光光度法测定[12]，TP选用钼酸铵分光光度法（GB/T 11893-1989）测定，COD的检测选用碱式高锰酸钾法测定。
1.3 微囊藻毒素的测定
1.3.1 试剂与仪器 试验用水为超纯水;甲醇为色谱纯;三氟乙酸为剖析纯;MC-RR、MC-LR规范品为白色粉末，纯度≥95%;检测剖析仪器为安捷伦1260 Infinity II液相色谱体系。
1.3.2 毒素规范曲线的制造 规范品母液的制备参照国标法水中微囊藻毒素的测定[13]。取适量母液加纯水稀释成浓度梯度为0.5，1.0，2.0，3.0，4.0，5.0 μg·mL-1。运用高效液相色谱仪测定峰面积及确认每种毒素的出峰时刻，测定条件为：色谱柱温为40 ℃，紫外可见光检测器波长为238 nm，活动相为0.05%三氟乙酸和60%色谱甲醇。制作峰面积与毒素标品浓度的规范曲线（图1）。
1.3.3 底泥中毒素的测定 底泥中MCs的测定参照樊洁等[14]对沉积物中检测的办法。取0～10 cm区间的表层底泥混匀，-80 ℃重复冻融后冻干，取冻干底泥1 g于离心管中，用10 mL提取液，重复提取3次，兼并3次提取所得的上清液，减压蒸腾浓缩至0.5～1.0 mL，分两次参加6 mL水混匀取出。用预先活化好的小柱顺次进行富集、淋洗、洗脱，将洗脱液减压浓缩后用甲醇溶液定容至1 mL，过膜存于棕色瓶中待HPLC检测。HPLC检测条件与毒素标曲条件相同。
1.3.4 毒素的回收率计算办法 回收率是点评毒素提取过程中的一个重要目标，其计算办法如下：
1.4 数据处理
数据选用均匀值±规范误差的格局表明，用Microsoft Excel 2007制图。运用SPSS19.0中的Pearson 相联络数法进行相关剖析。
2 成果与剖析
2.1 水化目标的改变
由图2能够看出，蓝藻迸发水体中的TN含量跟着采样日期呈时间短下降后逐步上升的趋势，改变规模为0.26（8月12日）～0.66（8月22日） mg·L-1，均匀值为0.53 mg·L-1;饲养水体中TP改变规模为0.23（8月18日）～0.60（8月22日）mg·L-1，均匀值为0.47 mg·L-1;COD 含量规模为6.23（8月12日）～7.86（8月22日） mg·L-1，均匀值为7.07 mg·L-1;氮磷比值（N/P）改变规模为0.49（8月14日）～2.59（8月18日）。
2.2 底泥中微囊藻毒素含量的改变
由图3可知，跟着采样日期的改变，MC-RR含量呈上升趋势，MC-LR含量呈下降趋势，MCs含量出现先升高后下降的趋势，三者改变规模顺次为0.53～0.86，0.01～0.68，0.87～1.34 μg·g-1，均匀值顺次為0.69，0.39，1.08 μg·g-1;8月12—14日底泥中MC-LR的含量高于MC-RR的含量，8月16—22日则相反，MCs含量最高值出现在8月14日。
2.3 微囊藻毒素与水化目标的相关性剖析
将MC-RR、MC-LR以及MCs别离与水化目标TP、TN、COD、N/P进行相关剖析（表1）。成果显现，MCs与TN呈明显负相关（P<0.05），其他目标间相关联络均未达明显水平（P>0.05）。
3 定论与评论
饲养水体中的饲养经济生物对水环境目标改变非常灵敏，水环境目标急剧改变会使饲养生物免疫力下降，成长缓慢[15-16]。饲养过程中应及时检测水化目标改变并合理采纳办法。据报导，促进蓝藻迸发的首要驱动因子有较高的氮、磷和COD含量[17-18]。Kong等[19]的研讨指出水体中TN和TP含量别离超越0.50 mg·L-1和0.02 mg·L-1就有可能发生蓝藻水华。吴阿娜等[20]对淀山湖研讨成果表明，蓝藻迸发期淀山湖水体中TP含量的改变规模0.06～1.04 mg·L-1，均匀值0.20 mg·L-1;TN含量改变规模0.39～9.33 mg·L-1，均匀含量2.42 mg·L-1。本试验与上述研讨成果根本共同，蓝藻迸发期TN（0.53 mg·L-1）和TP（0.47 mg·L-1）含量均值亦别离超越了0.50 mg·L-1和0.02 mg·L-1，二者改变规模别离为0.26～0.66 mg·L-1， 0.23～0.60 mg·L-1。潘晓洁等[21]研讨指出滇池蓝藻迸发时COD的均匀含量为8.89 mg·L-1;杨希存等[22]对洋河水库的研讨中指出蓝藻高发期洋河水库水体中COD含量为5.09 mg·L-1。本试验中COD含量规模介于上述两个研讨之间，为6.23～7.86 mg·L-1，均匀含量为7.07 mg·L-1。
底泥是MCs归趋的首要场所。田大军等[23]指出蓝藻迸发时，淮河流域某县河流底泥中MC-RR的含量最高可到达0.802 μg·g-1。樊洁等[14]指出天然水体下底泥中MC-LR含量最大值为0.28 μg·g-1，MC-RR最大含量为0.32 μg·g-1。本试验中，MC-RR含量呈上升趋势，改变规模为0.53～0.86 μg·g-1，MC-LR含量不断下降，改变规模为0.01～0.68 μg·g-1，MCs总量改变规模为0.87～1.34 μg·g-1。 水环境因子可影响水中MCs的浓度[24-25]，现在有关底泥中MCs与水化目标联络报导较少，本试验参照水体中MCs含量与水化目标的相关联络作为参照进行剖析。王经结等[26]、毛敬英等[27]对滇池和太湖研讨中指出水中MCs与TN、TP正相关，本试验中，MC-RR与TN和TP正相关，MC-LR与TN和TP负相关，MCs与TP正相关，但相关联络均未达明显水平（P>0.05），MCs与TN明显负相关（P<0.05）。相关剖析成果不同的原因可能是底泥中MCs与水中MCs含量改变不同，但因本试验未剖析水体中MCs的改变趋势，故相关研讨有待于进一步展开。魏代春等[28]对阳澄湖和滆湖水中的MCs与COD含量相关性剖析得出：MC-RR、MC-LR含量与COD含量极明显正相关（P<0.01），本试验中MC-RR与COD含量正相关，MC-LR、MCs与COD含量负相关，但相关联络均未达明显水平（P>0.05）。因为试验地址不同或蓝藻迸发程度不同，MCs与N/P的相关联络不同。张杭君等[25]研讨指出太湖流域水体中MC-RR含量与N/P极明显正相关（P<0.01）;潘晓洁等[21]对滇池流域研讨成果显现马村湾、海东湾水体中MCs含量与N/P极明显负相关（P<0.01）;郑利等[29]研讨成果表明武汉莲花湖水中MCs与N/P明显负相关（P<0.05）。本试验中，N/P与MC-RR、MC-LR以及MCs含量负相关，但相关联络未达明显水平（P>0.05）。
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